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脂肪干细胞通过免疫抑制提高胰岛移植效果

薛武军, 焦自钊

西安交通大学第一附属医院

目的 观察脂肪干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)对同种异体胰岛移植的免疫抑制作用及其对移植胰岛的存活及功能的影响。方法 采用Ⅰ型胶原酶分离并培养SD大鼠ADSCs、Liberase酶消化及Ficoll 400分离纯化SD大鼠胰岛,分ADSCs-胰岛组及胰岛组。应用Wistar大鼠脾脏淋巴细胞混合淋巴细胞培养(mixed leukocyte culture, MLC),比较两组胰岛对淋巴细胞增值的影响。Wistar大鼠皮下胰岛移植,比较两组大鼠血清细胞因子浓度、外周血淋巴细胞百分比、血糖、胰岛素水平及移植物存活时间;免疫组化双染观察两组胰岛细胞存活及凋亡状况;HE染色观察两组胰岛淋巴细胞浸润情况。结果 MTT检测混合淋巴细胞培养7d的淋巴细胞OD值ADSCs-胰岛组小于胰岛组(P<0.05)。胰岛移植7d,ELISA检测Wistar大鼠血清IFN-γ、IL-2、IL-10浓度,ADSCs-胰岛组的IFN-γ、IL-2浓度均低于胰岛组(P<0.05),IL-10浓度于ADSCs-胰岛组高于胰岛组(P<0.05);外周血CD4+T及CD8+T细胞平均比例于ADSCs-胰岛组均低于胰岛组(P<0.05)。胰岛移植7d,HE染色淋巴细胞计数,ADSCs-胰岛组低于胰岛组(P<0.05);免疫组化双染,胰岛素的表达于ADSCs-胰岛组大于胰岛组,Fas的表达于ADSCs-胰岛组小于胰岛组。移植后60d,Wistar大鼠血糖、胰岛素水平,多元分析显示,两组间均有显著性差异(P<0.05),其中ADSCs-胰岛组优于胰岛组;胰岛移植物于ADSCs-胰岛组的平均存活时间(Mean survival time,MST) 为22.6±6.7d,于胰岛组为6.2±1.6d,经log-rank 检验,两组生存时间差异具有显著意义(P<0.01)。结论 ADSCs能够通过调节受体淋巴细胞增值及其细胞因子分泌产生免疫抑制作用,从而减轻胰岛移植物的免疫损伤,提高胰岛移植的效果。
关键词:脂肪干细胞胰岛;移植;免疫抑制